> اخبار > اخبار صنعت

چرا کشت سلولی ابتدا گلبول های قرمز را لیز می کند؟

2022-12-23

مقدمه اولیه
گلبول قرمز یکی از ساده‌ترین و آسان‌ترین روش‌های حذف گلبول‌های قرمز است، یعنی تقسیم گلبول‌های قرمز با لیزات که به سلول‌های هسته‌دار آسیب نمی‌رساند و می‌تواند گلبول‌های قرمز را به طور کامل حذف کند. جداسازی لیزات یک روش خفیف حذف گلبول های قرمز خون است که عمدتاً برای جداسازی و خالص سازی سلول های بافتی پراکنده شده توسط هضم آنزیمی، جداسازی و خالص سازی لنفوسیت ها و حذف گلبول های قرمز خون در آزمایشات پروتئین بافت و نوکلئیک استفاده می شود. استخراج اسید سلول‌های بافتی به‌دست‌آمده از لیز گلبول‌های قرمز حاوی گلبول‌های قرمز نیستند و می‌توان از آنها برای کشت اولیه، همجوشی سلولی، فلوسیتومتری، جداسازی و استخراج اسید نوکلئیک و پروتئین و غیره استفاده کرد.

دستورالعمل استفاده
نمونه سلول بافتی
1. بافت های تازه توسط لوزالمعده/آنزیم یا کلاژناز هضم و در سوسپانسیون تک سلولی پراکنده شدند و مایع رویی با سانتریفیوژ دور انداخته شد.

2. لیز ELS را از یخچال در دمای 4 بگیرید، لیز ELS را به رسوب سلولی به نسبت 1:3-5 اضافه کنید (3-5 میلی لیتر لیزات را به 1 میلی لیتر سلول فشرده شده اضافه کنید)، به آرامی باد کرده و مخلوط کنید.

3. با دور 800-1000 به مدت 8-5 دقیقه سانتریفیوژ کنید و مایع شفاف قرمز بالایی را دور بریزید.

4. قسمت رسوب داده شده جمع آوری و با محلول Hank یا محلول کشت بدون سرم 2-3 بار سانتریفیوژ شد.

5، اگر ترک کامل/کامل نباشد می توان مراحل 2 و 3 را تکرار کرد.

6. سلول های معلق مجدد برای آزمایش های بعدی. اگر RNA استخراج می شود، بهتر است این کار را در محلول تهیه شده از مرحله 4 با استفاده از آب DEPC انجام دهید

گلبول‌های قرمز چرخه زندگی بسیار کوتاهی دارند، فقط 120 روز، اما خون را خیلی سریع تولید می‌کنند و در این مورد به ویژه توانایی تقسیم سلولی را دارند و سریع‌ترین سلول‌های تقسیم‌کننده هستند، بنابراین این سلول بسیار ارزشمند است. بنابراین برای کشت سلولی بسیار مفید است. این بسیار ساده است، هیچ اندامکی در آن وجود ندارد، فقط غشای سلولی و پروتئین دارد.

قبلی:کیت الایزا چه وظایفی دارد؟

بعد:الزامات معرف و نمایش اولیه غلظت محلول.