> وبلاگ > مواد مصرفی آزمایشگاهی

چگونه رگ های کشت سلولی مناسب را انتخاب کنیم؟

2024-11-29

انتخاب ابزار کشت مناسب برای اطمینان از رشد سلولی بهینه و نتایج تجربی بسیار مهم است. هنگام انتخاب رگ‌های کشت سلولی، مهم است که عواملی مانند نوع سلول، هدف خاص کشت، مقیاس کشت، نوع محیط کشت، مواد و اندازه رگ‌ها، تیمارهای سطحی، درب‌ها را در نظر بگیرید. تبادل گاز و سازگاری آنها با تجهیزات آزمایشگاهی شما.

در اینجا فاکتورهای کلیدی برای انتخاب رگ کشت سلولی مناسب وجود دارد

1. ظرف کشت سلولی را بر اساس نوع سلول انتخاب کنید

سلول های چسبنده

این سلول ها نیاز به سطحی برای چسباندن و پخش شدن دارند. برای سلول‌های چسبنده، به عروقی با سطحی نیاز دارید که فضای کافی برای اتصال و رشد سلول فراهم کند.

نمونه فلاسک های کشت بافتی، پتری دیش ها و صفحات چند چاهی.

سلول های تعلیق

این سلول ها به صورت شناور در محیط رشد می کنند، بنابراین سطحی در نظر گرفته نمی شود.

نمونه هافلاسک های کشت بافتفلاسک های اسپینر یا بیوراکتورها برای کشت های معلق در مقیاس بزرگ.

2. ظرف کشت سلولی را بر اساس اندازه انتخاب کنید (ظرفیت حجمی)

فرهنگ های مقیاس کوچک

برای آزمایش‌های مقیاس کوچک یا غربالگری با توان بالا، کشتی‌های کوچک‌تر ایده‌آل هستند.

نمونه‌هایی از صفحات چند چاهی (صفحه‌های کشت سلولی 6، 24، 96)،ظروف پتری، یا فلاسک T25.

فرهنگ های در مقیاس بزرگ

اگر نیاز به رشد مقادیر زیادی سلول دارید، عروق بزرگتر یا بیوراکتورها بهتر هستند.

فلاسک های کشت سلولی T75 و T175، بیوراکتورها، یا فلاسک های اسپینر برای کشت های سلولی سوسپانسیون.

3. ظرف کشت سلولی را بر اساس درمان سطحی انتخاب کنید

سطوح تیمار شده با کشت بافت

عروق برای تقویت اتصال سلولی از قبل درمان می شوند و آنها را برای انواع سلول های چسبنده مناسب می کند. اینها به طور کلی با موادی مانند کلاژن، فیبرونکتین یا سایر اجزای ماتریکس خارج سلولی پوشیده شده اند.

سطوح درمان نشده

ایده آل برای کشت های سوسپانسیون یا زمانی که سلول ها نیازی به چسبیدن به سطح ندارند. آنها معمولا برای سلول هایی که آزادانه در محیط رشد می کنند استفاده می شوند.

4. ظرف کشت سلولی را بر اساس مواد انتخاب کنید

پلی استایرن معمولاً برای کاربردهای استاندارد کشت سلولی استفاده می شود. واضح است و امکان بازرسی بصری آسان را فراهم می کند و هم برای سلول های چسبنده و هم برای سلول های معلق خوب عمل می کند.

پلی کربنات یا پلی پروپیلن برای کاربردهای خاص بیوراکتور و برای کشتی هایی که به انعطاف پذیری بیشتر یا عملیات سطحی خاصی نیاز دارند استفاده می شود.

شیشه های مورد استفاده برای کشت بافت استاندارد به دلیل هزینه و قابلیت شکستن، ظروف شیشه ای ممکن است برای کاربردهای خاص یا کشت های در مقیاس بزرگ مناسب باشند.

5. انتخاب کنیدمواد مصرفی کشت سلولیبر اساس طراحی کشتی

فلاسک ها

برای کشت سلولی عمومی، فلاسک های T (T25، T75، T150) معمولا استفاده می شود. سطح صاف، ناحیه خوبی برای اتصال و رشد سلول فراهم می کند. در صورت حفظ شرایط مناسب، می توان آنها را هم برای سلول های چسبنده و هم برای کشت سوسپانسیون استفاده کرد.

ظروف پتری

برای کشت‌های در مقیاس کوچک و آزمایش‌هایی که نیاز به مشاهده دارند، مانند سنجش تشکیل کلونی، رایج است.

صفحات چند چاهی

اینها برای غربالگری با توان بالا و آزمایشات در مقیاس کوچکتر مفید هستند. بشقاب های 6، 12، 24، 48،96، یا 384 چاه در دسترس است و برای سنجش های مبتنی بر سلول، آزادسازی سیتوکین، آزمایش دارو و سایر کاربردهای با کارایی بالا ایده آل هستند.

فلاسک های اسپینر

برای کشت سلولی سوسپانسیون استفاده می شود، به ویژه در حجم های بزرگتر که در آن تحریک کنترل شده برای حفظ رشد سلول و جلوگیری از جمع شدن سلول ضروری است.

بیوراکتورها

برای کشت سوسپانسیون در مقیاس بزرگ، بیوراکتورها کنترل پیچیده تری را بر شرایط محیطی (مانند pH، دما، اکسیژن رسانی) امکان پذیر می کنند و برای تولید در حجم زیاد، مانند تولید داروی زیستی استفاده می شوند.

6. ظرف کشت سلولی را بر اساس عقیمی و تهویه انتخاب کنید

عقیمی

از استریل بودن ظرف یا استریل بودن آن اطمینان حاصل کنید تا از آلودگی جلوگیری شود. اکثر ظروف کشت تجاری از قبل استریل شده اند، اما همیشه بسته بندی را بررسی کنید.

تهویه

برخی از ظروف، مانند فلاسک ها، دارای درپوش یا فیلترهایی هستند که امکان تبادل هوا را فراهم می کند و از آلودگی جلوگیری می کند. این در هنگام کشت سلول ها در شرایط با چگالی بالا ضروری است.

7. ظرف کشت سلولی را بر اساس راحتی استفاده انتخاب کنید

اتوکلاو در مقابل یکبار مصرف

برخی از ظروف کشت را می توان برای استفاده مجدد اتوکلاو کرد (به عنوان مثال، بطری های شیشه ای، فلاسک های پلاستیکی خاص)، در حالی که برخی دیگر یک بار مصرف و یکبار مصرف هستند (مانند ظروف پتری پلاستیکی، صفحات چند چاهی).

جابجایی و حمل و نقل

سهولت انتقال سلول ها بین عروق را در نظر بگیرید. برای مثال، صفحات چند چاهی ممکن است به صفحات تخصصی برای جابجایی آسان با تجهیزاتی مانند پیپتتورهای خودکار نیاز داشته باشند.

8. ظرف کشت سلولی را بر اساس حجم محیط کشت انتخاب کنید

ظرفی را انتخاب کنید که بتواند حجم مورد نظر محیط کشت را بدون اتلاف منابع در خود جای دهد. در صورت کار با یک کشت با حجم بالا، فلاسک های بزرگتر یا بیوراکتورها ممکن است لازم باشد، در حالی که حجم های کوچکتر برای ظروف یا صفحات کشت سلولی مناسب است.

9. ظرف کشت سلولی را بر اساس ملاحظات هزینه انتخاب کنید

یکبار مصرف در مقابل قابل استفاده مجدد

ظروف پلاستیکی یکبار مصرف مقرون به صرفه هستند و خطر آلودگی را کاهش می دهند، اما می توانند برای عملیات در مقیاس بزرگ گران باشند. ظروف شیشه ای قابل استفاده مجدد هزینه اولیه بالاتری دارند اما می توان آنها را استریل کرد و چندین بار مورد استفاده مجدد قرار داد و برای استفاده طولانی مدت مقرون به صرفه تر می شود.

بازده حجمی

اطمینان حاصل کنید که اندازه ظرف مناسب است تا از هدر رفتن مواد جلوگیری شود، به خصوص در هنگام استفاده از محیط های رشد یا معرف های گران قیمت.

10. ظرف کشت سلولی را بر اساس الزامات کاربردی خاص انتخاب کنید

تصویربرداری

اگر می‌خواهید سلول‌ها را زیر میکروسکوپ تجسم کنید، رگ‌هایی با مواد شفاف نوری و ابعاد مناسب برای تنظیمات تصویربرداری خود انتخاب کنید (مثلاً صفحات چند چاهی برای غربالگری با محتوای بالا یا ظروف کف شیشه‌ای برای تصویربرداری سلول زنده).

تحریک کنترل شده

برای کشت‌های سلولی سوسپانسیون، فلاسک‌های اسپینر یا بیورآکتورهایی را در نظر بگیرید که برای معلق نگه داشتن یکنواخت سلول‌ها، هم زدن کنترل‌شده را فراهم می‌کنند.

نتیجه گیری

انتخاب مخزن کشت سلولی مناسب مستلزم ایجاد تعادل در چندین فاکتور از جمله نوع سلول، مقیاس کشت، سازگاری مواد و نیازهای آزمایشی خاص است. سلول‌های چسبنده به سطوحی نیاز دارند که چسبندگی را تقویت می‌کنند، در حالی که سلول‌های تعلیق از حجم‌های بزرگتر و هم زدن بهره می‌برند. برای کارهای در مقیاس کوچک، صفحات چند چاهی یا فلاسک های T ممکن است کافی باشند، در حالی که کشت های بزرگتر ممکن است به فلاسک های اسپینر یا بیوراکتور نیاز داشته باشند. همیشه اطمینان حاصل کنید که رگ‌ها الزامات استریلی و جابجایی شما را برآورده می‌کنند و مقرون به صرفه بودن را بر اساس استفاده خود در نظر بگیرید.

با در نظر گرفتن این عوامل می توانید رگ بهینه ای را انتخاب کنید که شرایط مناسبی را برای کشت سلولی و اهداف آزمایشی شما فراهم می کند.

قبلی:راهنمای نکات مختلف پیپت آزمایشگاهی

بعد:نکات پیپت کوتاوس تولید شده با کنترل کیفیت دقیق